《國家精品課程配套立體化教材:細胞生物學實驗教程(第2版)》是王金發(fā)教授主持編寫的細胞生物學配套實驗教材。是在2004年出版的《細胞生物學實驗教程》基礎(chǔ)上重新修訂的。全書包括12章共71個實驗,內(nèi)容既保留了目前在細胞生物學研究領(lǐng)域中經(jīng)常用到的經(jīng)典實驗,又新增了部分與現(xiàn)代細胞生物學和分子生物學相關(guān)的新技術(shù),如線粒體膜電位檢測、抗性膜和膽固醇去除、細胞電泳技術(shù)、DNA、RNA和蛋白質(zhì)的原位雜交、差異基因表達、酵母中cDNA表達、細胞凋亡檢測、果蠅胚胎的共聚焦顯微技術(shù)等。
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《細胞生物學實驗教程(第2版)》包括12章共71個實驗,內(nèi)容既保留了目前在細胞生物學研究領(lǐng)域中經(jīng)常用到的經(jīng)典實驗,又新增了不少與現(xiàn)代細胞生物學和分子生物學相關(guān)的新技術(shù),包括:線粒體膜電位檢測,抗性膜和膽固醇去除,細胞電泳技術(shù),DNA、RNA和蛋白質(zhì)的原位雜交,差異基因表達,酵母中cDNA的表達,細胞凋亡檢測,果蠅胚胎的共聚焦顯微技術(shù)等。書中新增的實驗內(nèi)容有20個,并對細胞減數(shù)分裂的內(nèi)容作了適當?shù)母膭樱瑢毎娪、細胞凋亡的?nèi)容重新作了全面的修改,也刪去了一些與其他學科重復(fù)的內(nèi)容。
目錄
第二版前言
第一版前言
第一章 光學顯微鏡技術(shù) 1
實驗1 普通光學顯微鏡的構(gòu)造原理及使用方法 1
實驗2 特殊顯微鏡的原理和使用 7
實驗3 光學顯微標本的制作技術(shù) 12
第二章 電子顯微鏡技術(shù) 21
實驗4 透射電子顯微鏡 21
實驗5 透射電子顯微鏡樣品制備 24
實驗6 掃描電子顯微鏡 28
實驗7 掃描電子顯微鏡樣品制備 30
第三章 細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu) 33
實驗8 細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)與幾種細胞器的觀察 33
實驗9 液泡系和線粒體的活體染色 34
實驗10 用熒光脂質(zhì)進行細胞活體染色 37
實驗11 植物細胞骨架的光學顯微鏡觀察 41
實驗12 細胞骨架的免疫熒光顯示 43
實驗13 細胞的超微結(jié)構(gòu) 46
實驗14 細胞的顯微測量 50
第四章 細胞化學 53
實驗15 DNA的細胞化學——Feulgen反應(yīng) 53
實驗16 RNA的細胞化學——Brachet反應(yīng) 55
實驗17 細胞中多糖和過氧化物酶的定位 56
實驗18 細胞中酸性磷酸酶的定位 58
實驗19 細胞中堿性磷酸酶的定位 60
第五章 細胞生理 62
實驗20 小鼠巨噬細胞吞噬的觀察 62
實驗21 胞飲作用 63
實驗22 細胞膜的通透性 64
實驗23 核質(zhì)穿梭測定法 66
實驗24 線粒體膜電位檢測 72
實驗25 細胞電泳 73
第六章 細胞分裂與染色體畸變 79
實驗26 細胞的無絲分裂與有絲分裂 79
實驗27 細胞減數(shù)分裂 81
實驗28 環(huán)境因素及輻射誘變?nèi)旧w改組的觀察 86
實驗29 細胞毒和細胞生長測定 88
實驗30 彗星測定 93
第七章 染色體技術(shù)與核型分析 96
實驗31 植物染色體標本的制備和觀察 96
實驗32 動物骨髓細胞染色體標本的制備 98
實驗33 人體外周血淋巴細胞培養(yǎng)與染色體標本制備 100
實驗34 人類染色體G帶技術(shù) 103
實驗35 植物染色體分帶技術(shù) 105
實驗36 人類體細胞染色體組型分析 107
實驗37 染色體核仁組織區(qū)(NOR)的顯示 109
實驗38 姐妹染色單體色差分析技術(shù) 111
第八章 細胞和組織培養(yǎng)技術(shù) 114
實驗39 植物組織培養(yǎng)技術(shù) 114
實驗40 原生質(zhì)體的分離和培養(yǎng) 117
實驗41 細胞計數(shù) 120
實驗42 動物細胞原代培養(yǎng) 121
實驗43 果蠅胚胎細胞的原代培養(yǎng) 123
實驗44 傳代細胞培養(yǎng) 126
實驗45 細胞的凍存與復(fù)蘇 128
第九章 細胞化學成分的分離 130
實驗46 細胞核與線粒體的分級分離 130
實驗47 高爾基體的分離 132
實驗48 核仁的分離 138
實驗49 過氧化物體的分離 143
實驗50 完整葉綠體的分離 149
實驗51 中期染色體的分離純化 151
實驗52 動物細胞基因組DNA的提取 154
實驗53 植物基因組DNA的提取 156
實驗54 細胞和組織總RNA的提取 157
第十章 蛋白質(zhì)、核酸的定位與檢測 159
實驗55 瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA片段 159
實驗56 同步檢測DNA、RNA和蛋白質(zhì)的原位雜交技術(shù) 161
實驗57 銀染法檢測凝膠中的蛋白質(zhì)——改良硝酸銀染法 168
實驗58 染色質(zhì)免疫共沉淀 170
實驗59 代表性差異分析:研究差異基因表達的方法 175
實驗60 酵母中cDNA表達 182
第十一章 細胞工程技術(shù) 189
實驗61 細胞融合 189
實驗62 植物體細胞雜交——原生質(zhì)體的融合 191
實驗63 單克隆抗體的制備 193
實驗64 產(chǎn)細胞克隆測定 200
實驗65 去污劑抗性膜和膽固醇去除的應(yīng)用 202
第十二章 其他技術(shù) 208
實驗66 細胞放射自顯影 208
實驗67 流式細胞技術(shù) 210
實驗68 熒光標記技術(shù) 216
實驗69 細胞凋亡的檢測 218
實驗70 共聚焦顯微技術(shù)及去旋技術(shù) 223
實驗71 果蠅胚胎的共聚焦顯微技術(shù) 235
參考文獻 242
附錄 246
附錄1 一些常用的換算 246
附錄2 常用試劑及溶液的配制和使用 246
附錄3 光學儀器保養(yǎng)與清潔的要點 251
附錄4 常用縮寫匯編 252
附錄5 常用細菌培養(yǎng)基的配方 254