微生物學是實踐性很強的學科，微生物學實驗技術(shù)是該學科的重要內(nèi)容。趙斌等編著的《微生物學實驗(第2版）》由長期從事微生物教學、科研工作的教師編寫，總結(jié)了編者多年的實驗教學經(jīng)驗和科研成果。本書包括93個實驗，共分六大部分：①微生物的形態(tài)學研究方法，介紹微生物的制片、染色及形態(tài)觀察；②微生物的純培養(yǎng)技術(shù)，介紹幾種常用培養(yǎng)基的配制、滅菌及微生物接種技術(shù)； ③微生物的營養(yǎng)及環(huán)境條件，介紹微生物的培養(yǎng)及生長條件；④微生物的分離與純化，介紹微生物的分離、純化、形態(tài)鑒定、生理生化鑒定和分子鑒定操作技術(shù)；⑤微生物育種技術(shù)與菌種保藏，介紹微生物的遺傳、育種、菌種保藏實驗操作方法；⑥應用微生物實驗，包括不同環(huán)境中(土壤、水體、食品)微生物的檢測、微生物細胞的熒光標記、酶活性檢測等研究技術(shù)，培養(yǎng)學生的綜合實踐能力。
《微生物學實驗(第2版）》可作為高等院校生命科學、微生物學、生物技術(shù)、生物工程、資源環(huán)境及植物病理學等專業(yè)的教學用書，也可作為研究生和相關研究人員的參考書。
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趙斌等編著的《微生物學實驗(第2版）》的內(nèi)容重點注重微生物學的基本實驗技術(shù)，包括顯微鏡的使用技術(shù)、微生物形態(tài)觀察的制片染色技術(shù)、微生物細胞大小測定與計數(shù)技術(shù)和微生物的純培養(yǎng)技術(shù)、微生物的分離鑒定技術(shù)。本書內(nèi)容介紹了微生物的最新研究技術(shù)，包括細菌的轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導、原生質(zhì)體融合、質(zhì)�？焖贆z測、DNA的PCR擴增、發(fā)光酶基因標記技術(shù)等。本書內(nèi)容兼顧了微生物的應用技術(shù)，包括酸乳制作、細胞固定化、食用菌栽培、根瘤菌和菌根應用等。
目錄
第一部分 微生物的形態(tài)學研究方法
Ⅰ 微生物的形態(tài)觀察 1
—、細菌的形態(tài)觀察 1
實驗一 普通光學顯微鏡的使用及活細菌觀察 1
實驗二 細菌的簡單染色和革蘭氏染色 5
實驗三 細菌的莢膜染色 8
實驗四 細菌的芽孢染色 10
實驗五 細菌的鞭毛染色（附細菌的運動性觀察） 11
實驗六 藍細菌的培養(yǎng)與觀察 15
二、放線菌形態(tài)觀察 16
實驗七 用玻璃紙瓊脂平板透析培養(yǎng)法觀察放線菌形態(tài) 16
實驗八 用插片培養(yǎng)法觀察放線菌的形態(tài) 16
實驗九 放線菌的印片染色法 17
三、真菌的形態(tài)觀察 18
實驗十 霉菌形態(tài)及無性孢子的觀察 18
實驗十一 霉菌封閉標本的制備 19
實驗十二 霉菌接合孢子的培養(yǎng)與觀察 20
實驗十三 酵母菌子囊孢子的培養(yǎng)與觀察 21
實驗十四 傘菌擔子和擔孢子的壓片觀察 22
實驗十五 鐮刀菌分生孢子的培養(yǎng)與觀察 22
四、病毒的形態(tài)觀察 23
實驗十六 昆蟲病毒多角體的染色與觀察 23
實驗十七 噬菌斑的培養(yǎng)與觀察 24
五、藻類和原生動物的形態(tài)觀察 25
實驗十八 衣藻和水綿的形態(tài)觀察 25
實驗十九 草履蟲和眼蟲的培養(yǎng)與觀察 27
實驗二十變形蟲的培養(yǎng)與觀察 28
Ⅱ 微生物的大小與數(shù)量測定 30
實驗二十一 微生物細胞大小的測定 30
實驗二十二 微生物細胞的顯微直接計數(shù)法 32
實驗二十三 稀釋平板測數(shù)法 34
實驗二十四 稀釋培養(yǎng)計數(shù) 36
實驗二十五 比濁法測定大腸桿菌的生長曲線 39
第二部分 微生物的純培養(yǎng)技術(shù)
Ⅰ 培養(yǎng)基的制備 41
一、培養(yǎng)基的配制方法 41
二、幾種常用培養(yǎng)基的配制 43
實驗二十六 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的制備 43
實驗二十七 高氏一號合成培養(yǎng)基的制備 44
實驗二十八 馬丁-孟加拉紅培養(yǎng)基的制備 45
實驗二十九 馬鈴薯蔗糖瓊脂培養(yǎng)基的制備 46
實驗三十 土壤浸出液培養(yǎng)基的制備 47
實驗三十一 麥芽汁培養(yǎng)基和米曲汁培養(yǎng)基的制備 48
實驗三十二 明膠培養(yǎng)基的制備 49
實驗三十三 石蕊牛乳培養(yǎng)基的制備 49
Ⅱ 滅菌和消毒 51
—、干熱滅菌法 51
二、濕熱滅菌法 52
三、過濾除菌 57
四、紫外線殺菌 58
五、化學藥劑消毒殺菌 58
Ⅲ 微生物接種技術(shù) 60
一、接種前的準備工作 60
二、幾種常用的接種技術(shù) 62
第三部分微生物的營養(yǎng)與環(huán)境條件
實驗三十四 營養(yǎng)元素對微生物生長的影響 65
實驗三十五 氧氣對微生物生長的影響 66
實驗三十六 溫度對微生物生長的影響 66
實驗三十七 pH對微生物生長的影響 67
實驗三十八 紫外線殺菌實驗 68
實驗三十九 化學藥劑對微生物的作用 70
實驗四十微生物的抬抗實驗 71
實驗四十一 微生物的耐鹽性實驗 71
第四部分 微生物的分離與純化
Ⅰ 微生物純培養(yǎng)分離純化的一 般方法 73
實驗四十二 土壤中好氣性細菌的分離與計數(shù)（附劃線分離法） 73
實驗四十三 厭氧細菌的分離培養(yǎng) 75
實驗四十四 土壤中纖維素分解菌的分離培養(yǎng) 76
實驗四十五 土壤中的固氮菌的分離培養(yǎng) 78
實驗四十六 豆科植物根瘤中根瘤菌的分離 79
實驗四十七 死蟲中蘇云金芽孢桿菌的分離 80
實驗四十八 土壤中有機磷農(nóng)藥降解菌的分離 81
實驗四十九 土壤中放線菌的分離與計數(shù) 82
實驗五十 土壤中真菌的分離與計數(shù) 83
實驗五十一 酒曲中酵母菌的分離 84
實驗五十二 擔子菌的彈射分離 84
實驗五十三 土壤中叢枝菌根真菌的篩選分離 85
實驗五十四 自然環(huán)境中噬菌體的分離 86
實驗五十五 土壤中藻類的分離 87
實驗五十六 土壤中原生動物的分離 89
Ⅱ 微生物的形態(tài)鑒定方法 91
實驗五十七 各類微生物菌落的識別 91
Ⅲ 微生物的生理鑒定常規(guī)實驗 93
實驗五十八 微生物對含碳化合物的分解和利用 93
唯一碳源實驗 93
糖、醇、糖苷類碳源的分解實驗 93
淀粉水解實驗 94
纖維素分解實驗 95
果膠分解實驗 96
油脂水解實驗 96
甲基紅(M.R.)實驗 97
乙酰甲基甲醇（V.P.)實驗 97
檸檬酸鹽實驗 98
實驗五十九 微生物對含氮化合物的分解和利用 99
唯一氮源實驗（無機氮） 99
明膠液化實驗 100
石蕊牛乳實驗 100
產(chǎn)氨實驗 101
產(chǎn)硫化氫實驗 102
硝酸鹽還原實驗 103
吲哚實驗 104
實驗六十 微生物的產(chǎn)酶實驗 105
過氧化氫酶實驗 105
苯丙氨酸脫氨酶實驗 106
卵磷脂酶實驗 106
實驗六十一 利用BIOLOG系統(tǒng)進行微生物的分類鑒定 107
Ⅳ 微生物的血清學鑒定 110
實驗六十二 抗血清制備 110
實驗六十三 直接凝集反應 112
實驗六十四 免疫電泳 115
實驗六十五 雙向免疫擴散 116
Ⅴ 微生物的分子鑒定 118
實驗六十六 細菌總DNA的提取 118
實驗六十七 PCR擴增細菌16S rRNA序列
第五部分 微生物育種技術(shù)和菌種保藏
實驗六十九三 親本雜交 124
實驗七十細菌的專性轉(zhuǎn)導 125
實驗七十一 細菌的轉(zhuǎn)座突變 129
實驗七十二 細菌的互補測驗 130
實驗七十三 大腸桿菌的中斷雜交實驗 131
實驗七十四 紫外線誘變技術(shù)及營養(yǎng)缺陷型突變株的篩選 134
實驗七十五 亞硝酸誘變技術(shù)及乳糖發(fā)酵突變株的篩選 137
實驗七十六 原生質(zhì)體融合 139
實驗七十七 脈孢菌的分離和交換 141
實驗七十八 微生物菌種保藏 143
第六部分 應用微生物實驗
實驗七十九 豆科植物根瘤的固氮酶活性測定 150
實驗八十 根瘤菌的熒光標記及檢測 152
實驗八十一 泡囊叢枝狀菌根的染色 154
實驗八十二 蘇云金芽孢桿菌殺蟲劑的生物測定 155
實驗八十三 抗生素的效價測定（管碟法） 158
實驗八十四 棉鈴蟲核多角體病毒的室內(nèi)培養(yǎng)及效價測定 160
實驗八十五 乙醇發(fā)酵（附巴斯德效應） 162
實驗八十六 乳酸發(fā)酵 165
實驗八十七 酸奶制作 166
實驗八十八 水中細菌總數(shù)和大腸菌群的檢測 168
實驗八十九 食品中菌落總數(shù)和大腸菌群的檢測 175
實驗九十 食品中沙門氏菌的檢測 179
實驗九十一 環(huán)境微生物細胞的固定化技術(shù) 184
實驗九十二 產(chǎn)蛋白酶和淀粉酶芽孢桿菌的分離和酶活力檢測 185
實驗九十三 利用PCR-DGGE方法對土壤微生物群落多樣性的檢測 188
主要參考文獻 194
附錄一 微生物實驗課常用玻璃器皿的清潔法 195
附錄二 教學常用菌種 198
附錄三 常用培養(yǎng)基配方 200
附錄四 常用染色液的配制 222
附錄五 緩沖液的配制 227
附錄六 常用試劑和指示劑的配制 232
附錄七 微生物混濁度計數(shù)法麥蘭云度計的配制與菌數(shù)對照表 235
附錄八 幾種法定單位的名稱與換算 236
附錄九 最大或然數(shù)統(tǒng)計表 238
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