曾秀瓊等編著的《化學生物學實驗》共8章,第1、2章介紹了化學生物 學實驗基本知識和基本操作。第3~7章是實驗部分,共編寫41個實驗,包括 生化分離分析實驗技術(shù)、生物材料制備實驗技術(shù)、化學中基因工程實驗技術(shù) 、化學中蛋白質(zhì)工程實驗技術(shù)和化學中細胞工程實驗技術(shù)。第8章附錄介紹 了15類化學生物學實驗常用儀器的使用方法,特殊試劑的配制,Linux操作 系統(tǒng)以及生物信息數(shù)據(jù)庫等重要資料。希望學生通過本課程的學習,掌握必 要的化學生物學實驗的基本知識和基本技能。
《化學生物學實驗》可作為高等學;瘜W、化工、材料、藥學、生物和 醫(yī)學等相關(guān)專業(yè)本科生、研究生的實驗教材,也可作為相關(guān)領(lǐng)域科技工作者 的參考書。
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曾秀瓊等編著的《化學生物學實驗》共編寫41個實驗,包括生化分離分析實驗技術(shù)、生物材料制備實驗技術(shù)、化學中基因工程實驗技術(shù)、化學中蛋白質(zhì)工程實驗技術(shù)和化學中細胞工程實驗技術(shù)。每個實驗都精心編寫了實驗導讀,提供了一定的背景材料,使學生能更好地了解這一交叉領(lǐng)域發(fā)展的基本狀況和最新進展。41個實驗既可單獨安排教學,也可相互聯(lián)系組合成較系統(tǒng)和深人的實驗系列,以滿足不同學時數(shù)的教學要求。
目錄
前言
第1章 化學生物學實驗基本知識 1
1.1 實驗室規(guī)則及須知 1
1.2 實驗室安全及防護知識 1
1.2.1 防生物源性危害的基本措施 2
1.2.2 放射性和紫外線輻射的危害和防護 2
1.2.3 特殊化學生物學試劑的安全使用與儲存 2
1.2.4 化學生物學實驗室廢棄物的處理 3
第2章 化學生物學實驗基本操作 6
2.1 常用儀器的洗滌與清潔 6
2.1.1 玻璃器皿的清洗 6
2.1.2 其他材質(zhì)器皿的清洗 6
2.1.3 鉻酸洗液的配制方法和使用注意事項 7
2.1.4 其他常用的洗液 7
2.2 常用消毒滅菌方法 7
2.2.1 物理消毒滅菌方法 7
2.2.2 化學消毒滅菌方法 8
2.3 離心技術(shù) 9
2.3.1 離心技術(shù)的原理 9
2.3.2 離心機的類型和轉(zhuǎn)頭的分類 11
2.3.3 常用離心方法 12
2.4 常用層析技術(shù) 13
2.4.1 凝膠層析 13
2.4.2 離子交換層析 14
2.4.3 親種層析 15
2.4.4 疏水層析 15
2.5 電泳技術(shù) 16
2.5.1 基本原理 16
2.5.2 瓊脂糖凝膠電泳 16
2.5.3 聚丙烯酰胺凝膠電泳 16
2.5.4 等電聚焦電泳 17
2.5.5 二維電泳 18
2.5.6 毛細管電泳 18
2.5.7 凝膠成像技術(shù) 19
2.6 PCR技術(shù) 19
2.6.1 PCR技術(shù)簡介 19
2.6.2 PCR技術(shù)的基本原理和過程 19
2.6.3 PCR反應的五個元素 21
2.7 DNA測序技術(shù) 22
2.8 細胞培養(yǎng)技術(shù) 23
2.8.1 體外培養(yǎng)細胞的分類 23
2.8.2 培養(yǎng)細胞的生長和增殖過程 24
2.8.3 原代培養(yǎng) 25
2.8.4 傳代培養(yǎng) 25
2.8.5 細胞的凍存與復蘇 26
2.9 化學生物學樣品制備、純化、濃縮和干燥 26
2.9.1 材料的選取和前處理 26
2.9.2 細胞的破碎 27
2.9.3 蛋白質(zhì)的提取和純化 27
2.9.4 核酸的提取和純化 28
2.9.5 樣品的濃縮和干燥 29
第3章 生化分離分析實驗技術(shù) 31
實驗1 疏水作用色譜分離純化α-淀粉酶 31
實驗2 親和層析樹脂的制備及溶菌酶的提取純化 36
實驗3 香菇多糖的提取、純化及總糖含量測定 40
實驗4 青霉素酰化酶米氏常數(shù)和反應活性的測定 44
實驗5 靜電自組裝構(gòu)筑HRP多層膜電極檢測酚類物質(zhì)研究 47
實驗6 表面等離子光譜生物傳感器研究抗原與抗體的相互作用 50
實驗7 FRET法及熒光猝滅法測定蛋白酶的活性 54
第4章 生物材料制備實驗技術(shù) 60
實驗8 生物礦物和生物礦化——碳酸鈣多形的控制與制備 60
實驗9 無定形碳酸鈣的制備和轉(zhuǎn)化 62
實驗10 硫酸鏈霉素肺靶向明膠微球的制備及含量測定 64
實驗11 聚乙烯亞胺-DNA復合物粒徑的測定 67
實驗12 聚乙烯亞胺-阿霉素共聚物的合成 70
實驗13 復凝聚法制備阿霉素微囊及細胞毒性評價 72
實驗14 鹽酸左氧氟沙星不同晶形的制備及其表征 76
第5章 化學中基因工程實驗技術(shù) 80
實驗15 質(zhì)粒DNA的提取與純化 80
實驗16 大腸桿菌感受態(tài)細胞制備與質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)化 84
實驗17 瓊脂糖凝膠電泳分離DNA片段 87
實驗18 PCR基因擴增獲取毛囊DNA及其分離 90
實驗19 植物組織中基因組DNA的提取與擴增 91
實驗20 PCR-RFLP法檢測單核苷酸多態(tài)性 95
實驗21 基于連接反應的滾環(huán)擴增技術(shù)檢測單核苷酸多態(tài)性 100
實驗22 枯草桿菌脂肪酶A的基因克隆 104
第6章 化學中蛋白質(zhì)工程實驗技術(shù) 112
實驗23 ;复呋4-硝基咪唑的Markovnikov加成反應 112
實驗24 2-脫氧尿苷衍生物的酶促合成的選擇性調(diào)控 114
實驗25 酶催化Michael加成反應 117
實驗26 Novozym 435催化的1-位芳基取代的末端炔丙醇動力學拆分反應 120
實驗27 金屬卟啉模擬的生物氧化過程 122
實驗28 泛素蛋白的操控式分子動力學模擬 125
實驗29 纖連蛋白在羥磷灰石上吸附一脫附過程的分子模擬 136
第7章 化學中細胞工程實驗技術(shù) 144
實驗30 動物細胞的培養(yǎng) 144
實驗31 MTT法測定聚乙烯亞胺的細胞毒性 148
實驗32 抗腫瘤藥物5-氟尿嘧啶對腫瘤細胞的抑制及細胞形態(tài)觀察 150
實驗33 ATP生物熒光藥敏檢測技術(shù)檢測5一氟尿嘧啶對卵巢癌細胞的藥敏實驗 153
實驗34 杭腫瘤藥物5-氟尿嘧啶對腫瘤細胞遷移的影響 156
實驗35 聚乙烯亞胺-DNA復合物的制備和體外細胞轉(zhuǎn)染實驗 158
實驗36 聚乙烯亞胺攜帶基因在細胞中的熒光染色實驗 160
實驗37 聚乙烯亞胺作為基因載體材料攜帶TRAII.基因?qū)毎蛲龅挠绊?163
實驗38 聚乙烯亞胺邛可霉素聚合物的細胞攝取實驗 166
實驗39 硫酸氫氯吡格雷對人胃黏膜上皮細胞株GES-1增殖影響 168
實驗40 喹諾酮類藥物鹽酸左氧氟沙星的抑菌實驗 170
實驗41 聚乙烯亞胺邛可霉素皮下注射體內(nèi)滯留實驗 172
第8章 附錄 175
8.1 常用儀器的使用說明 175
8.1.1 移液槍 175
8.1.2 氣相色譜儀 177
8.1.3 液相色譜儀 178
8.1.4 紫外可見分光光度計 179
8.1.5 紅外光譜儀 181
8.1.6 熒光分光光度計 182
8.1.7 PCR儀 183
8.1.8 表面等離子共振生物傳感實驗儀 184
8.1.9 蛋白質(zhì)分離純化系統(tǒng) 187
8.1.10 CHI電化學分析儀 188
8.1.11 高速冷凍離心機 189
8.1.12 C02培養(yǎng)箱 191
8.1.13 倒置相差顯微鏡 192
8.1.14 酶標儀 193
8.1.15 活體熒光成像系統(tǒng) 194
8.2 常用緩沖溶液的配制 195
8.3 常用特殊化學生物學試劑的配制 197
8.3.1 細胞培養(yǎng)液的配制 197
8.3.2 MTT溶液的配制方法 198
8.3.3 HE染色液的配制 198
8.4 Linux操作系統(tǒng)的基本操作 199
8.5 生物信息數(shù)據(jù)庫 200