目錄
第三版前言
緒論 / 1
0.1細胞工程簡介 / 1
0.2細胞工程的發(fā)展史 / 2
第一篇細胞工程的技術(shù)基礎(chǔ)
第1章細胞培養(yǎng)的設(shè)施與基本條件 / 7
1.1細胞工程實驗室的設(shè)置 / 7
1.1.1動物細胞工程實驗室的設(shè)置 / 7
1.1.2植物細胞工程實驗室的設(shè)置 / 8
1.2常用儀器與設(shè)備 / 8
1.2.1動物與植物細胞工程實驗室通用的儀器設(shè)備 / 8
1.2.2動物細胞工程實驗室的常用儀器設(shè)備 / 12
1.2.3植物細胞工程實驗室的常用儀器設(shè)備 / 14
1.3實驗室的生物安全 / 14
第2章清洗與消毒 / 16
2.1清洗 / 16
2.1.1玻璃器皿的清洗 / 16
2.1.2膠塞的清洗 / 17
2.1.3塑料制品的清洗 / 17
2.1.4G6除菌濾器的清洗 / 17
2.1.5不銹鋼除菌濾器的清洗 / 17
2.1.6包裝 / 17
2.2消毒 / 18
2.2.1物理滅菌法 / 18
2.2.2化學消毒法 / 19
實驗1器械的清洗與消毒 / 20
第3章細胞培養(yǎng)的基本方法 / 22
3.1無菌操作技術(shù) / 22
3.1.1實驗器具和材料的準備 / 22
3.1.2培養(yǎng)室和超凈臺的消毒 / 22
3.1.3洗手和著裝 / 23
3.1.4無菌培養(yǎng)操作 / 23
3.2培養(yǎng)細胞的觀察 / 23
3.2.1相差顯微鏡觀察 / 24
3.2.2培養(yǎng)細胞的觀察 / 25
3.3細胞培養(yǎng)中常用的染色方法 / 26
3.3.1活體染色 / 26
3.3.2染料排除檢測法 / 26
3.4細胞培養(yǎng)的污染和檢測 / 27
3.4.1污染途徑 / 27
3.4.2污染對培養(yǎng)細胞的影響及檢測 / 28
3.4.3污染的預防 / 29
3.4.4污染的排除 / 29
第二篇動物細胞工程
第4章細胞培養(yǎng) / 33
4.1培養(yǎng)細胞的生物學特征 / 34
4.1.1體外培養(yǎng)細胞的分型 / 34
4.1.2培養(yǎng)細胞的生長特點 / 35
4.1.3培養(yǎng)細胞的生長與增殖過程 / 35
4.1.4培養(yǎng)細胞的遺傳學特征 / 37
4.1.5體內(nèi)外細胞的差異及培養(yǎng)細胞的分化 / 37
4.2細胞培養(yǎng)液 / 38
4.2.1細胞培養(yǎng)的常用液體 / 38
4.2.2培養(yǎng)基 / 39
4.3細胞的基本培養(yǎng)技術(shù) / 45
4.3.1原代培養(yǎng) / 46
4.3.2傳代培養(yǎng) / 49
4.3.3常用培養(yǎng)技術(shù) / 50
4.4細胞系和細胞株的建立 / 58
4.4.1細胞系和細胞株的種類 / 58
4.4.2建立細胞系(或株)的要求 / 59
4.4.3細胞系和細胞株的鑒定 / 59
4.5細胞的凍存？復蘇和運輸 / 60
4.5.1細胞的凍存 / 60
4.5.2細胞的復蘇 / 60
4.5.3細胞的運輸 / 60
實驗2細胞培養(yǎng)液的配制 / 62
實驗3原代細胞培養(yǎng) / 63
實驗4培養(yǎng)細胞的增殖及活力測定 / 65
實驗5細胞的傳代培養(yǎng) / 67
實驗6細胞的凍存和復蘇 / 68
第5章細胞融合與單克隆抗體 / 69
5.1單克隆抗體技術(shù) / 70
5.1.1單克隆抗體技術(shù)的原理 / 70
5.1.2雜交瘤制備 / 71
5.1.3單克隆抗體的大量制備 / 77
5.2人源性單克隆抗體制備 / 78
5.2.1EB 病毒轉(zhuǎn)化技術(shù) / 78
5.2.2細胞工程單克隆抗體技術(shù) / 79
5.2.3人單抗制備技術(shù)的發(fā)展 / 82
5.3單克隆抗體在醫(yī)學上的應(yīng)用 / 84
5.3.1單克隆抗體靶向制劑 / 84
5.3.2單克隆抗體在腫瘤診斷與治療中的應(yīng)用 / 85
實驗7動物細胞融合 / 87
第6章胚胎工程 / 88
6.1胚胎發(fā)育的基本過程和機制 / 88
6.1.1胚胎發(fā)育的基本過程 / 89
6.1.2胚胎發(fā)育的基本機制 / 93
6.2體外受精 / 96
6.2.1體外受精的研究歷史 / 96
6.2.2體外受精技術(shù) / 96
6.3胚胎移植技術(shù) / 98
6.3.1胚胎移植的研究歷史 / 98
6.3.2胚胎移植技術(shù) / 99
6.4胚胎分割技術(shù) / 100
6.4.1胚胎分割的方法 / 101
6.4.2分割胚的培養(yǎng) / 101
6.4.3胚胎分割目前存在的問題和發(fā)展前景 / 102
6.5早期胚胎的體外培養(yǎng) / 102
6.5.1胚胎的發(fā)育阻滯 / 102
6.5.2克服胚胎發(fā)育阻滯的方法 / 103
6.6胚胎冷凍保存技術(shù) / 104
6.6.1抗凍保護劑和冷凍溶液 / 104
6.6.2胚胎的冷凍方法 / 104
6.7動物的性別控制 / 105
6.7.1動物的性別決定 / 105
6.7.2性別控制的方法與技術(shù) / 106
6.7.3性別控制的意義 / 109
實驗8哺乳動物體外受精和早期胚胎的體外培養(yǎng) / 111
第7章干細胞與組織工程 / 113
7.1胚胎干細胞 / 114
7.1.1胚胎干細胞的研究概況 / 114
7.1.2胚胎干細胞的生物學特性 / 114
7.1.3胚胎干細胞的建系 / 115
7.1.4ES細胞的鑒定 / 116
7.1.5ES細胞的應(yīng)用前景及面臨的難題 / 117
7.2成體干細胞 / 118
7.2.1造血干細胞 / 118
7.2.2神經(jīng)干細胞 / 118
7.2.3胰島干細胞 / 119
7.2.4皮膚干細胞 / 119
7.3組織工程 / 119
7.3.1組織工程化皮膚 / 119
7.3.2組織工程化骨骼 / 120
7.3.3組織工程化血管 / 120
7.3.4組織工程化管狀器官 / 120
7.3.5組織工程化腺體器官 / 120
第8章核移植技術(shù)與動物克隆 / 122
8.1核移植技術(shù) / 122
8.1.1核移植技術(shù)的類型 / 122
8.1.2核移植技術(shù)的一般操作程序 / 123
8.2核移植技術(shù)的應(yīng)用 / 124
8.2.1核移植技術(shù)的應(yīng)用 / 124
8.2.2核移植技術(shù)存在的問題 / 125
實驗 9魚類核移植實驗 / 126
實驗10哺乳類細胞核移植實驗 / 127
第9章轉(zhuǎn)基因動物與動物生物反應(yīng)器 / 128
9.1轉(zhuǎn)基因動物的培育技術(shù) / 128
9.1.1基因顯微注射法 / 129
9.1.2逆轉(zhuǎn)錄病毒感染法 / 129
9.1.3胚胎干細胞介導法 / 130
9.1.4精子載體導入法 / 130
9.1.5YAC 介導的基因轉(zhuǎn)移 / 130
9.1.6轉(zhuǎn)基因細胞核移植技術(shù) / 131
9.2轉(zhuǎn)基因動物的應(yīng)用 / 131
9.2.1改良動物品種 / 131
9.2.2生物制藥 / 131
9.2.3建立診斷和治療人類疾病的動物模型 / 131
9.2.4生產(chǎn)可用于人體器官移植的動物器官 / 132
9.2.5基因治療 / 132
9.2.6基因打靶 / 133
9.2.7轉(zhuǎn)基因動物應(yīng)用面臨的問題 / 133
9.3動物乳腺生物反應(yīng)器 / 134
9.3.1動物乳腺生物反應(yīng)器的制備 / 134
9.3.2動物乳腺生物反應(yīng)器的優(yōu)點 / 135
9.3.3動物乳腺生物反應(yīng)器的應(yīng)用 / 135
9.3.4動物乳腺生物反應(yīng)器存在的問題 / 136
實驗11磷酸鈣沉淀法轉(zhuǎn)染細胞 / 138
實驗12電穿孔和電融合技術(shù) / 139
第10章動物染色體工程 / 141
10.1動物染色體倍性改造 / 141
10.1.1動物的多倍體育種 / 141
10.1.2動物的單倍體育種 / 144
10.2動物染色體結(jié)構(gòu)的改造 / 145
10.2.1染色體片段的刪除和重排 / 145
10.2.2染色體的易位工程 / 146
10.3人工染色體 / 146
10.3.1酵母人工染色體 / 146
10.3.2細菌人工染色體 / 147
10.3.3哺乳類人工染色體 / 147
10.3.4人工染色體的應(yīng)用 / 147
推薦網(wǎng)址 / 149
第三篇植物細胞工程
第11章植物組織培養(yǎng) / 153
11.1植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ) / 154
11.1.1植物的無性繁殖 / 154
11.1.2植物細胞全能性理論 / 154
11.1.3植物細胞的脫分化和再分化 / 154
11.2植物組織培養(yǎng) / 156
11.2.1實驗材料的清洗和消毒 / 157
11.2.2培養(yǎng)基 / 158
11.2.3接種 / 163
11.2.4種質(zhì)保存 / 163
11.2.5植物細胞的大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù) / 165
實驗13植物組織培養(yǎng)培養(yǎng)基的配制 / 169
實驗14植物細胞的懸浮培養(yǎng)及其次生代謝產(chǎn)物的生產(chǎn) / 171
實驗15植物葉片的脫分化和再分化培養(yǎng) / 173
第12章植物的快速繁殖 / 174
12.1植物快速無性繁殖 / 174
12.2植物脫毒 / 175
12.3植物快速繁殖和試管苗工廠化生產(chǎn)中的注意事項 / 176
實驗16月季快繁 / 178
第13章體外單倍體誘導與單倍體育種 / 179
13.1植物小孢子發(fā)育過程 / 179
13.2花藥和花粉培養(yǎng) / 180
13.2.1花藥培養(yǎng) / 180
13.2.2花粉培養(yǎng) / 180
13.2.3小孢子母細胞培養(yǎng) / 181
13.3花藥與花粉培養(yǎng)方法 / 182
13.3.1材料的選擇 / 182
13.3.2材料的預處理 / 183
13.3.3培養(yǎng)基 / 184
13.3.4接種與再生植株的培育 / 185
13.4單倍體育種在生產(chǎn)實踐中的應(yīng)用 / 186
第14章植物胚胎培養(yǎng) / 188
14.1胚培養(yǎng) / 188
14.1.1成熟胚培養(yǎng) / 188
14.1.2幼胚培養(yǎng) / 188
14.1.3胚培養(yǎng)的意義 / 189
14.2子房培養(yǎng) / 190
14.3被子植物胚乳培養(yǎng) / 191
14.3.1植物胚乳的發(fā)育特性 / 191
14.3.2影響胚乳培養(yǎng)的因素 / 191
14.3.3胚乳培養(yǎng)的意義 / 191
實驗17植物幼胚培養(yǎng) / 192
實驗18玉米成熟胚的培養(yǎng) / 193
第15章體細胞胚胎發(fā)生和人工種子 / 194
15.1愈傷組織與體細胞胚胎發(fā)生 / 194
15.1.1愈傷組織的誘導 / 194
15.1.2愈傷組織器官的發(fā)生 / 195
15.2人工種子 / 195
15.2.1人工種子的制備 / 196
15.2.2人工種子的研究現(xiàn)狀 / 198
第16章植物原生質(zhì)體融合技術(shù) / 199
16.1植物原生質(zhì)體的制備 / 199
16.1.1植物原生質(zhì)體的分離 / 199
16.1.2影響植物原生質(zhì)體數(shù)量和活力的因素 / 200
16.1.3植物原生質(zhì)體的純化 / 200
16.1.4植物原生質(zhì)體的培養(yǎng)方法 / 201
16.2植物原生質(zhì)體的融合 / 201
16.2.1植物原生質(zhì)體的融合技術(shù) / 201
16.2.2融合體 / 202
16.3雜種細胞的篩選 / 203
16.3.1遺傳互補選擇法 / 203
16.3.2可見標記法 / 203
16.4體細胞雜種的鑒定 / 203
16.5體細胞融合的意義 / 204
實驗19植物體細胞原生質(zhì)體的制備及融合 / 205
第17章植物染色體工程 / 207
17.1植物染色體倍性改造 / 207
17.1.1染色體加倍技術(shù) / 207
17.1.2植物的多倍體育種 / 209
17.1.3植物的單倍體育種 / 211
17.2植物染色體非整倍體改造 / 213
17.2.1染色體的削減 / 213
17.2.2染色體的添加 / 214
第18章植物轉(zhuǎn)基因技術(shù) / 216
18.1植物基因轉(zhuǎn)化技術(shù) / 217
18.1.1農(nóng)桿菌介導轉(zhuǎn)化法 / 217
18.1.2基因槍介導轉(zhuǎn)化法 / 218
18.2轉(zhuǎn)基因植物 / 219
18.2.1植物抗蟲基因工程 / 220
18.2.2植物抗病基因工程 / 220
18.2.3植物抗逆基因工程 / 220
18.2.4植物品質(zhì)改良的基因工程 / 220
18.2.5植物葉綠體基因工程 / 220
18.2.6植物生物反應(yīng)器 / 220
實驗20土壤農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化實驗 / 222
推薦網(wǎng)址 / 223
參考文獻 / 224
附錄 / 229
英文專業(yè)名詞索引 / 234